轻度胃肠炎伴婴幼儿良性惊厥（BICE）是 1982 年由日本学者Morooka 首次提出的。目前对 于BICE 的病因及发病机制尚无明确的定论。有的 学者考虑其发病机制同高热惊厥有一定的共性： 小儿的脑发育尚未成熟，在一定的诱因影响之下， 体内的环境受到了影响，引起大脑细胞异常放电 从而发生了惊厥^[1]。硫化氢（H₂S）是人们继一氧 化氮（NO）与一氧化碳（CO）之后所发现的又一 个气体信号传导分子，随着研究的深入，有越来 越多的证据显示，H₂S 对于人体具有广泛的病理生理作用，内源性H₂S 具有很强的抗氧化以及保护 神经的功能，并在惊厥的发生、发展过程中起着 重要的作用，但是内源性H₂S 是否参与了 BICE 的 发病机制目前尚不清楚。本研究通过测定在我院 住院治疗的42 例BICE 患儿血清H₂S 水平的变化， 分析其在BICE 病程中的意义及临床价值。 1　资料与方法 1.1　研究对象

2012 年1 月至2014 年1 月在我院确诊为 BICE 并住院治疗的42 例患儿作为观察组，其中男 22 例，女20 例，平均年龄1.7±1.2 岁。选择同期 因单纯急性胃肠炎入院治疗的46 例患儿为对照组， 其中男25 例，女21 例，平均年龄1.8±1.3 岁。 对照组患儿既往健康，发育正常，均无惊厥病史。 本研究经过了医院医学伦理委员会批准并均签署 了家属知情同意书。 1.2　诊断标准

BICE 的诊断标准^[2]：（1）婴儿既往健康； （2）惊厥发作时不发热，可有轻度脱水，但无明 显酸中毒和电解质紊乱；（3）常发生在冬季急性 胃肠炎病程的第1~5 天；（4）惊厥基本形式为 全身强直—阵挛性发作，可为单次或多次发作； （5）发作间歇期脑电图正常；（6）血清电解质、 血糖、脑脊液常规检查正常。 1.3　静脉血的采集

在确诊后的24 h 内两组患儿用无抗凝干燥管 分别抽取静脉血2 mL，在室温下静置约30 min， 然后保持温度在4℃，离心分离血清后保存在-60℃ 的冰箱里。 1.4　H₂S 的检测方法

在空试管中加入醋酸锌0.5 mL（10 g/L），然 后加入0.1 mL 解冻好的血清标本，充分振荡摇匀， 使血浆中的硫离子与醋酸锌结合形成硫化锌胶体， 再先后加入0.5 mL 的20 mmol/L 对苯二铵盐酸盐 以及0.4 mL 的30 mmol/L 三氯化铁溶液，在室温 下放置约20 min，之后加入三氯醋酸（100 g/L）， 在蛋白沉淀后再加入去离子水使之定容至2.5 mL， 离心12 000 r/min，5 min，吸取上清液，使用分光 光度计在670 nm 处来测定吸光度值。最后根据 H₂S 标准曲线计算出H₂S 水平。以上试剂均购自美 国Sigma 公司。 1.5　统计学分析

应用SPSS 17.0 统计软件包进行统计分析， 计量资料用均数± 标准差（x±s）表示，组间 比较采用方差分析或成组t 检验。相关分析采用 Pearson 线性相关分析检验。P<0.05 为差异有统计 学意义。 2　结果 2.1　两组患儿血清H₂S 水平的比较

观察组患儿血清H₂S 水平显著低于对照组， 差异有统计学意义（P<0.O1），见表 1。

表 1(Table 1)

表 1 两组患儿血清H2S 水平的比较

表 1 两组患儿血清H2S 水平的比较

BICE 患儿不同惊厥发作次数（< 2 次和≥ 2 次）患儿血清H₂S 水平比较差异有统计学意义 （t=2.46，P=0.018）。不同惊厥持续时间（< 5 min 和≥ 5 min）患儿血清H₂S 比较差异无统计学意义 （t=0.93，P=0.36）。见表 2。

表 2(Table 2)

表 2 不同惊厥发作次数、惊厥持续时间患儿血清H2S 水 平的比较　（ x±s，μmol/L） 注：a 示与惊厥发作< 2 次组比较，P<0.O1。

表 2 不同惊厥发作次数、惊厥持续时间患儿血清H2S 水 平的比较　（ x±s，μmol/L）

BICE 组患儿惊厥发作次数与血清H₂S 水 平呈负相关（r=-0.485，P=0.001），见图 1； 惊厥持续时间与血清H₂S 水平呈负相关性 （r=-0.457，P=0.002）。分组统计后显示，惊厥 持续时间<5 min 组患儿的发作时间与血清H₂S 水平无明显相关性（r=0.135，P=0.486），惊厥持续 时间≥ 5 min 组患儿的发作时间与血清H₂S 水平呈 负相关（r=-0.736，P=0.004），见图 2。

图 1 惊厥发作次数与血清H2S 水平的关系

图 2 惊厥持续时间≥ 5 min 组患儿惊厥发作时间与 血清H2S 水平的关系

既往研究多数认为BICE 预后良好，并无后 遗症出现，但随着对BICE 研究的逐渐增多，对 BICE 的临床表现及预后有了较为深入的认知。有 研究报道在755 例轮状病毒肠炎患者中，17 例出 现了热性惊厥，42 例出现了无热惊厥，并且无热 惊厥发作的频率要比热性惊厥发作的频率显著增 高^[3]。路新国等^[4] 考虑BICE 在频繁惊厥发作时对 中枢神经元会造成损伤。国外有报道BICE 向癫癎 的转化率为2.3%，热性惊厥发生率为5.5%，复发 率为4.7%^[5]。国内也有报道40 例BICE 患儿中1例进展为癫癎，另外有8 例在发作间期检测到癫 癎样放电^[6]。

H₂S 分子小，并且脂溶性较高，无需特异性的 载体就可以进出细胞膜来进行介导各种生物学效 应的特点。哺乳动物体内的H₂S 主要是L- 半胱氨 酸的代谢，体内胱硫醚-β- 合成酶（CBS）同胱硫 醚-γ- 裂解酶（CSE）能裂解半胱氨酸产生H₂S， 它们同属于磷酸吡多醛-5'- 磷酸依赖性酶，经过它 们的酶解催化是体内产生H₂S 的主要途径^[7]。大多 数的CBS 存在于中枢神经系统，在皮层、丘脑、 纹状体、海马、小脑的神经元胞体以及突起都有 表达。

韩颖等^[8] 报道H₂S 能够上调GABAB 受体。 H₂S 上调GABA 受体可能对于维持大脑兴奋/ 抑 制平衡方面起重要的作用。生理浓度的H₂S 可 以通过调节γ- 氨基丁酸受体以维持大脑神经元 兴奋／抑制的平衡状态^[9]。Timm 染色结果显示 CBS 抑制剂hydroxylamine 干预后的海马发芽加 重，NaHS 干预后的海马苔藓纤维发芽减轻。海马 苔藓纤维发芽可引起基于轴突发芽基础上的新的 回返兴奋环路的形成和突触重构，从而引起突触 兴奋性的增高以及惊厥阈下降^[10]。以上研究表明 H₂S 的减少可以引起惊厥阈值的下降。有研究报道 H₂S 可以抑制NOS 的酶活性，还可以降低NO 对 CGMP 的敏感性，从而使NO 产出减少^[11]。有报道 NO 的代谢产物在轮状病毒所导致的BICE 患儿血 清以及脑脊液中升高，而在脑炎、化脓性脑膜炎、 热性惊厥及正常儿童中正常^[12]。同时有研究报道 NO 可增加患儿对惊厥的敏感性^[13]。基于以上研 究考虑体内H₂S 水平下降可能会引起体内NO 水 平的升高，从而导致患儿易出现惊厥。Huang 等^[2] 认为婴幼儿在急性胃肠炎或病毒血症状态下，惊 厥的发生与“惊厥阈值”降低有关。本研究显 示，BICE 组患儿血清H₂S 水平较对照组明显降 低。从而可以推测，在BICE 患儿病程中，患儿体 内的CBS 受到抑制，致使内源性H₂S 生成减少， 对NOS 的酶活性抑制减少，NO 合成增多，导致 BICE 患儿的惊厥阈值降低，容易诱发惊厥发作。

有研究报道H₂S 可以通过增加抗氧化剂谷胱 甘肽的水平并且激活KATP 以及氯离子通道从而 保护神经细胞氧化应激，同时通过清除氧自由基 来保护神经元^{[14, 15]}。有报道H₂S 可直接清除氧自由基^[16]。而氧自由基生成增多是氧化应激损伤脑 组织的重要的机制。H₂S 可以通过抑制NO/NOS 体系，防止由于NO 过度增多所造成的自由基损 伤^[9]。H₂S 还可以通过舒张血管从而改善脑血液循 环^[17]。有报道过度抑制缺血- 再灌注损伤初期大 鼠升高的H₂S 可以加重脑损伤^[18]。在脑损伤的早 期给予小剂量H₂S 可以使内源性H₂S 达到生理水 平，可以明显减轻脑损伤^[19]。以上研究表明内源 性H₂S 具有保护神经元的作用，提示体内H₂S 的 水平与脑损伤的程度密切相关，而早期给予外源 性H₂S 可以减轻脑损伤。本研究发现BICE 组患儿 血清H₂S 水平显著低于对照组，惊厥发作次数与 血清H₂S 水平呈负相关；在惊厥持续时间的分组 统计中，惊厥持续时间<5 min 组患儿的发作时间 与血清H₂S 水平无明显相关性，而惊厥持续时间 ≥ 5 min 组患儿的发作时间与血清H₂S 水平呈负相 关。考虑BICE 患儿惊厥持续时间大于5 min 后血 清H₂S 水平存在随惊厥持续时间的延长而降低的 趋势。内源性H₂S 水平与BICE 患儿惊厥发作的次 数以及持续时间有关。推测BICE 患儿惊厥发作早 期体内自由基大量产生，为清除体内大量的自由 基而过度消耗内源性H₂S，导致体内的内源性H₂S 进一步减少。而体内H₂S 水平降低越明显，患儿 惊厥持续时间越长，惊厥发作次数越频繁，患儿 出现脑损伤的可能性越大。

血清 H₂S 的检测对于判断BICE 的发生以及惊 厥持续时间、惊厥发作次数具有重要价值，其水 平降低程度对于预测BICE 患儿的预后也有一定的 参考价值。检测血清H₂S 的操作简单方便，所需 费用较低，方便在医院普遍开展，建议在临床工 作中开展血清H₂S 水平的检测。