支气管哮喘（简称哮喘）是呼吸系统的常见 病和多发病，病变主要为可逆性气流受限，儿童 常表现为咳嗽、咳痰、气喘，活动时加重，常常 严重影响生存质量。肺炎支原体（MP）感染被认 为是哮喘重要的发病因素^[1]。研究发现，哮喘患者 气道、肺实质、肺血管中均存在着慢性炎症，中 性粒细胞、巨噬细胞、嗜酸性粒细胞、T 细胞均参 与其中， 但它们各自在哮喘发展过程中的确切功 能目前尚未完全明了^{[2, 3]}。关于T 细胞亚群在儿童 哮喘的急性期、稳定期中的变化的研究较少，且 结果也缺乏一致性。因此本研究就MP 感染对哮喘 患儿支气管肺泡灌洗液（BALF）中T 细胞亚群功 能的影响进行了研究。现报告如下。 1　资料与方法 1.1　研究对象

选取2011 年3 月至2012 年3 月入住我院呼 吸科的哮喘患儿50 例为研究对象，其中非MP 感 染的哮喘组26 例，男19 例，女7 例，平均年龄 6.8±1.9 岁；MP 感染哮喘组24 例，男15 例，女 9 例，平均年龄7.9±2.1 岁。两组患儿均符合我国 《儿科学》（第7 版）中关于儿童哮喘的诊断标 准^[4]，并排除营养不良，先天遗传代谢性疾病、先 天性支气管肺发育不良、间质性肺疾病、呼吸衰竭、 肺结核、支气管异物以及糖皮质激素使用者。MP 诊断标准^[5]：MP-IgM 抗体：双份血清（间隔1~2 周）， 恢复期滴度上升4 倍或下降至原来的1/4；单份血 清抗体滴度持续升高>1 : 160。另选取同期入住我 院呼吸科的对照组患儿21 例，男14 例，女7 例， 平均年龄7.4±2.1 岁，无MP 感染史，临床表现为 单纯咳嗽，经血液分析、痰液细胞学及肺功能检 查均无异常发现，胸部影像学提示一般支气管炎、 支气管肺炎或大叶性肺炎。 1.2　肺功能测定

入院时应用肺功能仪检测1 秒用力呼气容积 （FEV1%）。 1.3　BALF 检测T 细胞亚群

术前签署支气管镜检查知情同意书。选用 3.6 mm 直径的纤维支气管镜（Olympus 3C40）， 于右肺中叶用37℃灭菌生理盐水进行灌洗，每 次1 mL/kg，共3 次，回收灌洗液，回收率应大于 60%；所得BALF 用2 层纱布过滤黏液后，立即置 于4℃、4 000 r/min 离心15 min。离心后取上清液， 冻存于-80℃冰箱中待检^[6]。采用流式细胞术检测 BALF 中CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/CD8⁺ 水平。 1.4　统计学分析

采用SPSS 13.0 统计软件对数据进行统计学处 理，计量资料以均数± 标准差（x±s）表示，多 组间比较采用方差分析，组间两两比较用SNK-q 检验。P<0.05 为差异有统计学意义。 2 结果 2.1　一般情况比较

各组在年龄、性别方面差异均无统计学意义 （均P>0.05）。两哮喘组患儿FEV1% 均低于对照 组（均P<0.05），但两哮喘组间FEV1％差异无统 计学意义（均P>0.05）。见表1。

表 1(Table 1)

表1　各组一般情况比较　（x±s，例）

表 1各组一般情况比较　（x±s，例）

入院时两哮喘组患儿BALF 中CD3⁺、CD4⁺ 及CD4⁺/CD8⁺ 均低于对照组，但CD8⁺ 有上升（均 P<0.05）。MP 感染哮喘患儿CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺ 明 显低于非MP 感染哮喘患儿，而CD8⁺ 则高于非 MP 感染哮喘患儿（均P<0.05）。见表2。

表 2(Table 2)

表2　入院时各组患儿BALF 中T 细胞亚群水平　（x±s）

表 2入院时各组患儿BALF 中T 细胞亚群水平　（x±s）

稳定期两哮喘组患儿BALF 中CD3⁺、CD4⁺ 及CD4⁺/CD8⁺ 均低于对照组， 但CD8⁺ 上升（ 均 P<0.05）。MP 感染哮喘患儿仅CD4⁺/CD8⁺ 明显低 于非MP 感染哮喘患儿（P<0.05）。见表3。

表 3(Table 3)

表3　入院时各组患儿BALF 中T 细胞亚群水平　（x±s）

表 3入院时各组患儿BALF 中T 细胞亚群水平　（x±s）

MP 目前已成为儿童与成人呼吸道感染的重要 病原^[7]，可引起肺外多系统损害，部分患儿病程 长、病情重，甚至引起多器官功能障碍综合征， 或多器官功能衰竭，甚至死亡。研究发现MP 感染 不但引起呼吸系统炎症，且与哮喘密切相关^{[8, 9, 10]}。 MP 诱发和引起哮喘的机制可能有以下几点^[11]： （1）气道黏膜损伤机制；（2）作为过敏原诱发 IgE 介导的Ⅰ型变态反应；（3）细胞因子和炎性 介质。

哮喘是由多种炎症细胞和炎症因子共同参与 的气道慢性炎症性疾病。作为一种变态反应性疾 病，哮喘存在体液和细胞免疫功能双重紊乱，表 现为辅助性T 细胞功能增强，而抑制性T 细胞功 能低下，研究发现Th1/Th2 比例失衡与哮喘发病 密切相关^{[12, 13]}。CD3⁺ 为总T 淋巴细胞，代表机体 的细胞免疫功能状态；CD4⁺ 为辅助型/ 诱导型T 细胞，对细胞免疫起调节作用；CD8⁺ 为细胞毒抑 制型T 细胞，与CD4⁺ 功能相反^[14]。临床上常用 CD4⁺/CD8⁺ 细胞比例来评价患者机体的免疫功能状 态^[15]。本研究结果显示，在哮喘的急性发作期和 稳定期，患儿BALF 中CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/ CD8⁺ 与对照组相比均有明显差异，急性期和稳定 期，CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺ 均较对照组降低，而 CD8⁺ 有上升。急性期时，伴MP 感染哮喘患儿的 CD4⁺ 和CD4⁺/CD8⁺ 明显低于无MP 感染的哮喘患 儿，而CD8⁺ 有上升；在稳定期，MP 感染组患儿 BALF 中仅CD4⁺/CD8⁺ 下降明显。提示无论是在急 性期还是稳定期，哮喘患儿BALF 中T 细胞的功 能异常主要表现在CD4⁺/CD8⁺ 的下降，这种改变 在伴MP 感染的哮喘患儿中尤为突出。患儿BALF 中CD4⁺/CD8⁺ 下降可能是CD8⁺ 数目增加所致，表 现为反复感染，说明气道局部免疫防御能力下降。 感染是哮喘急性加重的主要原因^[16]。有研究 表明，CD8⁺ 细胞的主要功能是通过分泌IFN-γ 和 TNF 对感染和改变的宿主细胞起到溶解作用，防 止感染发生^[17]。反复呼吸道感染可使CD8⁺ 细胞过 度聚集，引起肺损伤。本研究结果显示，CD8⁺ 细 胞在哮喘患儿气道可能出现异常浸润，导致免疫 损伤，进一步引起免疫功能下降。

综上所述，在治疗哮喘的过程中，有必要进 行适当地免疫治疗，对于有MP 感染的病例，必须 正规治疗，清除病原。