支 气 管 肺 发 育 不 良（bronchopulmonary dysplasia,BPD）是早产儿最常见的慢性肺部疾 病，病死率高，存活者常遗留高反应性气道疾 病、反复下呼吸道感染、喂养困难、生长发育迟 缓，因此是国内外新生儿医生面临的最具挑战性 的早产儿呼吸系统疾病^[1]。BPD 的发生与多因素有关，有研究报道，胎龄小于 32 周、出生体重 小于 1 500 g、新生儿呼吸窘迫综合征（respiratory distress syndrome,RDS）、机械通气治疗等是 BPD 发生的高危因素^{[2, 3]}，而气管内滴入肺泡表面活性 物质（pulmonary surfactant,PS）有降低 BPD 发生 的可能。但目前越来越多的证据证明，BPD 的发生 与宫内感染导致胎儿肺部炎症反应，继而发生肺部 损伤有关，即“新型 BPD”。多种病原微生物可引 起宫内感染，近 30 年来的研究发现^[4]，解脲脲原 体（Ureaplasma urealyticum,UU）是人类泌尿生殖 道感染最常见的病原微生物之一，成年女性生殖道 中的寄居率为 40%~80%，妊娠期更高。UU 是宫内 感染的主要病原体之一，其感染与早产、绒毛膜羊 膜炎、先天性肺炎、BPD 的发生有关^{[5, 6, 7]}。目前国 内关于 UU 感染对极低出生体重儿（very low birth weight infant,VLBWI）并发 BPD 的影响的报道较 少。本研究应用荧光定量聚合酶链反应（multiplexpolymerase chain reaction,PCR） 方 法 检 测 UU，在 排除 BPD 常见高危因素情况下，探讨并发 RDS 的 VLBWI UU 感染与 BPD 的相关性。 1　资料与方法 1.1　研究对象

入选标准：2011 年 2 月至 2013 年 10 月在我 院 NICU 住院治疗、胎龄小于 32 周、出生体重小 于 1 500 g 的 VLBWI；为排外其他高危因素对 BPD 的影响，所有病例均诊断为新生儿 RDS，使用机 械通气治疗且生后至少使用 1 剂 PS，住院时间均 大于 28 d。排除标准：先天畸形（包括除外动脉 导管未闭的先天性心脏病），明确宫内细菌感染者， 先天性白血病、母亲及婴儿有各种遗传代谢性疾 病等，所有病例均行胃液及下呼吸道吸出物 UUDNA 检测，对结果不一致的病历未纳入本研究中。 新生儿 RDS、BPD、先天性肺炎等的诊断标准均参 照《实用新生儿学》第 4 版^[8]。

符合纳入标准的病例共73例，入院年 龄 均 小 于 3 h，胎 龄 29.1±1.2 周，出 生 体 重 1164±141 g。73 例新生儿分为 UU 感染组（n=21） 和非感染组（n=52）。胃液及下呼吸道分泌物 UUDNA 均为阳性，生后早期（日龄 2 周内）胸片提 示“肺部有渗出性改变”等炎症性病理改变者称 为 UU 感染组^[6] ；胃液及下呼吸道分泌物 UU-DNA 均阴性者为非 UU 感染组。两组新生儿胎龄及出生 体重差异均无统计学意义（表 1）。 1.2　样本收集

入院后立即插胃管抽吸胃液 2 mL 置于无菌干 燥试管中。生后 12 h 内留取呼吸道分泌物，采用 开放吸痰法采集气管分泌物，婴儿暂时与机械通 气分离，用吸痰管插入导管末端吸引，用负压吸 引将分泌物吸入无菌标本收集器中；如果没有分 泌物吸出，可先滴入 1 mL 无菌生理盐水，5 次呼 吸后取样。标本采集后立即送本院中心实验室， 立即检测或冻存于 - 80℃冰箱直至检测。 1.3　标本检测 采 用 PCR 法 检 测 UU-DNA：胃液及下呼 吸道分泌物标本经生理盐水洗涤、离心、加热 裂解、DNA 提取后行荧光定量 PCR。反应条件 为：预变性 94℃ 5 min，扩增条件：93℃ 2 min， 93 ℃ 45 s，55 ℃ 60 s，10 个 循 环；93 ℃ 30 s， 55℃ 45 s，30 个循环。根据标准曲线判定结果。 <5e×10² copies/mL 为 阴 性，≥ 5e×10² copies/mL 为阳性。PCR检测仪由美国MJ 公司购进，仪器名称： ABI Prism 7 500，试剂由中山大学达安基因提供。 1.4　统计学分析

用 SPSS 21.0 统计软件包对数据进行统计学分 析。两组间计数资料率的比较采用X²检验。呈正 态分布的计量资料采用均数±标准差（x±s）表示， 组间比较采用t检验；偏态分布计量资料采用中位 数（四分位间距）[M（P25,P75）] 表示，组间比 较采用非参数检验。以P<0.05 为差异有统计学意 义。 2　结果 2.1　UU 感染组与非感染组临床特点的比较

UU 感染组阴道产、胎膜早破、多次肺部院 内感染率及吸氧天数、住院天数高于非感染组 （P<0.05），而性别构成比、出生窒息发生率、脑 室内 - 脑室周围出血（PIVH）发生率、机械通气 持续时间等两组比较差异无统计学意义，见表 1。

表1(Table 1)

表 1　UU 感染组与非感染组患儿临床情况比较　[（x±s；例（%）；M（P25,P75）]

表1 UU 感染组与非感染组患儿临床情况比较　[（x±s；例（%）；M（P25,P75）]

另外母亲年龄、受教育程度、第一产及产前 应用地塞米松促肺成熟百分率等两组比较差异无 统计学意义。73 例患儿中，共行早产儿视网膜病筛查 62 例，UU 阳性组发生早产儿视网膜病 9 例， 阴性组 15 例，两组比较差异无统计学意义。另外， 有胎膜早破的 UU 感染组 9 例胎膜早破持续时间 [48.0（11,204）] h，非感染组 10 例胎膜早破持续 时间 [7.0（2,24）] h，UU 感染组胎膜早破时间显 著长于非感染组（Z=-2.046，P=0.041）。 2.2　BPD 发生率

73 例患儿中，发生 BPD 45 例（62%）。BPD 组胎龄（28.3±1.6 周）及出生体重（1 120±176 g） 均小于非 BPD 组（胎龄 30.0±1.1 周，出生体重 1 297±154 g），两 组 比 较t 值 分 别 为 -2.908、 -3.163，P 值 分 别 为 0.007、0.003。UU 感 染 组 BPD 发生率显著高于非 UU 感染组，差异有统计学 意义（X²=10.365，P=0.001），见表 2。

表 2(Table 2)

表 2　UU 感染组与非感染组患儿 BPD 发生率的比较 [ 例（%）]

表 2　UU 感染组与非感染组患儿 BPD 发生率的比较 [ 例（%）]

表 3(Table 3)

表 3　两组患儿临床感染指标的比较　[M（P25,P75）]

表 3　两组患儿临床感染指标的比较　[M（P25,P75）]

UU 属于柔膜体纲，是最小的自我复制微生物， 主要定植在呼吸道和泌尿生殖道真核细胞中，属 人支原体科，脲原体属。UU 感染最易受累的脏器 为胎盘组织、绒毛膜羊膜、胎儿和新生儿的肺组 织及中枢神经系统^[9]。目前国内外多项研究表明 ^[5]， UU 感染与早产儿先天性肺炎、BPD 等发生关系密 切。本研究发现，UU 感染组阴道产百分率及反复 院内肺部感染、胎膜早破发生率均高于非感染组； 胎膜早破持续时间长于非 UU 感染组；且吸氧时间 及住院时间均长于非 UU 感染组。

Marconi 等^[10]报道，在胎膜早破发生时，UU 定植的母亲，羊水中中性粒细胞和炎性细胞因子 如 IL-8、IL-6 、IL-1β 和 TNF-α、前列腺素如 PGE2 和 PGF2-α 均增加，UU 感染引起绒毛膜羊 膜炎，炎症因子促进子宫收缩、宫颈扩张、胎膜 破裂。UU 感染可能发生在妊娠早期，并在胎儿发 育过程中持续存在。本研究中，UU 阳性组胎膜早 破发生率高于阴性组，生后 3 h WBC、中性粒细胞 绝对值、血浆免疫球蛋白 IgM 高于阴性组，支持 宫内炎症反应的存在。阳性组胎膜早破持续时间长于阴性组，提示 UU 可能出生前或产时从下生 殖道上行感染胎儿。阴道产患儿 UU 阳性率高于剖 宫产患儿，说明产时感染 UU 的可能性。

BPD 的发生与多因素有关，国内外专家一致 认为：胎龄小于32 周、出生体重小于1 500 g、 RDS、机械通气治疗等是 BPD 发生的高危因素 ^{[2, 3]}， 而气管内滴入 PS 有降低 BPD 发生的可能。本研究 为排除上述常见高危因素对 UU 感染与 BPD 相关 性研究的影响，选取病例均为并发 RDS、出生体 重小于 1 500 g、至少使用 1 次 PS 气管内滴入、需 机械通气治疗的 VLBWI。大量文献报道，UU 的下 呼吸道定植和感染与 BPD 发生相关^{[5, 6, 7]}。本研究显 示，73 例 VLBWI 中发生 BPD 45 例，其中 UU 感 染组发生 BPD 19 例（90%），非 UU 感染组发生 BPD 26 例（50%），UU 感染组 BPD 发生率显著 高于非 UU 感染组，提示 UU 感染可增加 VLBWI BPD 的发生率。UU 诱导早产儿肺部损害，可能的 原因为：UU 感染可能发生在妊娠早期，并在胎儿 发育过程中持续存在。在妊娠 23~32 周，肺处于 感染和炎症介导的易感期^[11]。UU 粘附于呼吸道 黏膜上皮细胞，产生多种蛋白和炎症细胞因子如 IL-1、IL-8 等，导致感染部位的炎症反应、细胞凋 亡及纤维化等病理损害；UU 代谢过程中尿素酶分 解尿素产生氨和二氧化碳 ,氨能引起细胞间质坏死 和纤毛损伤导致肺损伤； UU 还可侵入宿主细胞， 在细胞内定植，逃避宿主免疫使感染慢性化，导 致早产儿慢性炎症和纤维化的发生^{[12, 13]} 。VLBWI 由于肺发育不成熟，肺间质和肺泡分化不全，弹 力纤维和结缔组织发育不良，各种刺激诱发肺过 度炎症反应、氧自由基损伤可造成肺发育停滞， 肺泡化过程受抑制，使肺泡数目减少，肺泡增大， 间质纤维化，形成 BPD 的病理改变。Schelonka 等^[14] 一篇 Meta 分析报道：UU 定植与绒毛膜羊膜 炎及生后白细胞增高有关，UU 呼吸道定植与 BPD 发生密切相关；而且在长时间氧疗和机械通气治 疗的婴儿，UU 在过度、失调炎症反应导致后续的 炎症损伤引起肺组织异常分隔和间质纤维化中起 着重要的作用。本研究可见，UU 感染后炎症反应 与氧疗之间形成恶性循环，从而使 UU 感染组吸氧 时间长于非 UU 感染组，加之 BPD 的发生增加，延长了住院时间及增加了院内获得性感染的机会。 总之，本研究显示，并发 RDS 的 VLBWI 下 呼吸道 UU 感染可增加 BPD 的发生率。