孤 独 症 谱 系 障 碍（autism spectrum disorders, ASD）是发生于 3 岁以前的神经发育障碍性疾病， 以社会交流障碍、行为重复刻板和兴趣狭窄为主 要特征，发病率逐年升高，2012 年美国疾控中心 最新统计表明 ASD 的患病率为 1.4%^[1]。ASD 的病 因及发病机制至今不清，遗传因素及环境因素可 能在其发病中占有重要地位 ^[2]。维生素 D 缺乏除 了引起钙磷代谢异常导致佝偻病和手足搐搦症外， 还具有调节免疫、抗肿瘤、抑制自身免疫等作用 ^[3]， 并且在脑发育过程中亦发挥重要作用 ^[4]。新近发现 ASD 患儿存在明显的脑发育异常 ^{[5, 6]}，并且推测维 生素 D 可能参与 ASD 的发病过程 ^[7]。目前维生素 D 缺乏是最为常见的营养缺乏性疾病之一，亦易 被人们忽视，为进一步了解 ASD 患儿维生素 D 的 营养状况，本研究对我科新诊断的 117 例 ASD 患 儿血清 25(OH)D 水平进行了检测，现报道如下。

2013 年 9 月至 2014 年 3 月在我院小儿神经 康复门诊初次确诊的 117 例 ASD 患儿为研究组， 以在我科门诊进行常规儿童保健检查的发育正常 儿童 109 例作为对照组。所有 ASD 患儿均符合 美国精神障碍诊断统计手册第五版（DSM-V）中 ASD 的诊断标准 ^[8]。ASD 组患儿平均年龄 49±26 个 月，男 91 例，女 26 例； 对 照 组 男 68 例，女 41 例，平均年龄 47±24 个月。两组儿童年龄、 性别分布比较差异无统计学意义，均正常参加户 外活动，2 个月内未添加维生素 D 制剂。本研究 通过吉林大学第一医院伦理委员会批准，并已在 中国临床试验注册中心注册（注册编号：ChiCTR- CCC-14004498）。

ASD 组与对照组儿童均于晨起空腹采集静脉 血 3 mL，留取血清，采用高效液相色谱 - 串联 质谱法检测血清中 25(OH)D 的水平，浓度单位用 ng/mL 表示，本步骤由广州金域检验公司完成。根 据 25(OH)D 检测结果，患儿维生素 D 营养状况分 为正常（>30 ng/mL）、不足（10~30 ng/mL）和缺 乏（<10 ng/mL） ^[9]。

应用 SPSS 17.0 统计软件进行统计学分析。对 各研究变量进行描述性分析，计数资料以绝对数 （%）表示，计量资料以均数 ± 标准差（x± s）表示。 两组间计量资料的比较采用两独立样本 t 检验；两 组间计数资料的比较采用卡方检验。 P<0.05 为差 异有统计学意义。

ASD 组患儿血清中 25(OH)D 水平明显低于对 照组，差异有统计学意义（ P<0.001）；ASD 组患 儿维生素 D 不足和缺乏率（89.7%）明显高于对照 组（52.3%），差异有统计学意义（ P<0.001）。 见表 1。

表 1(Table 1)

表 1 两组儿童维生素 D 营养状况的比较

表 1 两组儿童维生素 D 营养状况的比较

DSM-V 与既往的 DSM-IV 相比，对 ASD 的诊 断发生了变化，主要是去除了既往 ASD 中不同亚 型的诊断，统称为 ASD；诊断标准中将 DSM-IV 中 社会交往障碍、交流障碍、重复刻板行为和兴趣 狭窄的三分法改为社会交流障碍、重复刻板行为 和兴趣狭窄两分法，诊断条目中删除了语言发育 落后或倒退，增添了不寻常的感觉兴趣和反应， 更符合临床实际情况 ^{[10, 11]}。本研究中 117 例 ASD 患儿均符合 DSM-V 的临床诊断。

维生素 D 是人体不可或缺的营养元素，除 了外源性摄入外，更主要是通过皮肤经紫外线照 射自身合成产生，皮肤中 7- 脱氢胆固醇在紫外 线（波长 290~315 nm,紫外线指数≥ 3）经光化 学作用转变为胆骨化醇 ,即内源性维生素 D₃，是 人类维生素 D 的主要来源。外源性和自身合成的 维生素 D₃ 在体内需经过两次羟化作用后始能发 挥生物效应：首先经肝细胞微粒体和线粒体中的 25- 羟化酶作用生成 25- 羟胆骨化醇 [25(OH)D₃]， 25(OH)D₃ 从肝脏释放入血，是维生素 D 在人体血 循环的主要形式。25(OH)D₃ 必须与 α- 球蛋白结 合，再转移到肾脏，经近端肾小管上皮细胞内 1α- 羟化酶作用下，再次羟化转变成 1,25- 二羟胆骨化 醇 [1,25(OH)₂D₃]，成为活性维生素 D，发挥维生 素 D 的代谢调节作用 ^[12]。新近研究发现，在脑组 织、肺脏、胰腺、肠道及单核细胞、巨噬细胞、 树突状细胞等均存在 1α - 羟化酶，证明在这些部 位均可将 25(OH)D₃ 羟化成为活性的 1,25-(OH)₂D₃， 显示维生素 D 具有自分泌和旁分泌的作用 ^{[13, 14]}。 应 用 血 清 25(OH)D 作 为 检 测 体 内 维 生 素 D 水 平 的指标，主要是由于 25(OH)D 在体内稳定，半衰期 长 达 2~3 周，优 于 1,25(OH)₂D₃，其 半 衰 期 仅 有 4 h，且其血清水平易受甲状旁腺素水平的影 响 ^{[15, 16]}。目前常用于检测 25(OH)D 的方法有高效 液相色谱 - 串联质谱法和化学发光法。由于高效 液相色谱 - 串联质谱法较免疫化学发光法有较 突出的优点，对目标化合物的选择定性和准确定 量； 可以剔除假阳性和假阴性并且准确检测维生 素 D 总量。Farrell 等 ^[17] 对 170 例随机选取的患者 标本分别采用高效液相色谱 - 串联质谱法和免疫 化学发光法检测，连续 5 d 取 2 份血清 5 次重复 测量以评估批内及批外分析精度，结果高效液相 色谱 - 串联质谱法的一致相关性为 0.99，平均偏 差为 1.4 nmol/L，免疫化学发光法的一致相关性 为 0.97，平均偏差为 2.7 nmol/L。因此，本研究采 用了高效液相色谱 - 串联质谱法对研究对象进行 了 25(OH)D 的检测。目前国际上尚无统一的评定 维生素 D 营养状况的标准，本研究采用国际上较 为常用的加拿大儿科协会的标准，将血清 25(OH)D 水平 >30 ng/mL 定义为正常，10~30 ng/mL 定义为 不足，<10 ng/mL 定义为缺乏 ^[9]。从本研究结果来 看，ASD 患儿血清 25(OH)D 水平明显低于对照组， 且 ASD 组 患 儿 维 生 素 D 缺 乏 占 17.1%，不 足 占 72.6%，缺乏和不足患儿百分率高达 89.7%，明显 高于对照组，说明 ASD 患儿中普遍存在维生素 D 缺乏和不足。此结果与沙特阿拉伯的学者 Mostafa 等 ^[18] 对利雅得的 ASD 患儿的血清 25(OH)D 的研 究有相似之处，他们研究中的 ASD 患儿维生素 D 缺乏占 40%，不足占 48%，不足和缺乏患儿百分 率高达 88%。另外，本研究正常对照组中，维生 素 D 缺乏占 1.8%，维生素 D 不足占 50.5%，维生 素 D 缺乏和不足的百分率与胡有瑶等报道的沈阳 地区（北纬 41.48°）儿童维生素 D 缺乏和不足率 44.28% 近似 ^[19]，但明显高于利雅得正常儿童 ^[18]， 可能与长春纬度（北纬 43.88°）明显高于利雅得（北 纬 24.38°），日照时间短有关。

生命早期维生素 D 缺乏影响神经元的分化、 轴突的连接、多巴胺系统的发育以及脑的结构和 功能 ^[20]。母孕期维生素 D 缺乏可能通过影响胎儿 脑发育及母体免疫功能成为儿童 ASD 的危险因 素 ^[21]；ASD 患儿在孕母服用影响维生素 D 代谢的 药物如抗癫癎药物丙戊酸中更为常见 ^[22]；新近研 究发现，维生素 D 缺乏与包括多发性硬化、系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病的自身抗体产生有 关 ^[23]，而 ASD 患儿体内已证实存在抗髓磷脂相关 糖蛋白自身抗体等，这些现象亦支持维生素 D 缺 乏可能是 ASD 发病的环境因素之一。同时，已有 研究表明，精神性疾病患者中维生素 D 代谢相关 的细胞色素氧化酶 P450，特别是 CYP27B1 和维生 素 D 受体存在着基因多态性及结构变异 ^[24]，从而 影响体内维生素 D 的代谢 ,而它们在 ASD 的作用 有待于进一步研究。

总之，本研究证实 ASD 患儿普遍存在维生 素 D 缺乏和不足，维生素 D 系统既可能作为诱发 ASD 的环境因素，亦可能作为 ASD 发生的遗传因 素。本研究存在的不足之处在于样本量较小，且 未对两组儿童间日照时间进行详细比较。因此， 进一步扩大样本量，进行科学设计对影响维生素 D 代谢的各种因素严格控制，深入研究维生素 D 在 ASD 发病机制中的作用，有可能为寻求治疗新途 径—补充维生素 D 治疗 ASD 提供理论依据。