人副流感病毒（human parainfluenza virus, HPIV）属副黏病毒科副黏病毒属，单股负链RNA 病毒，分为4 型（HPIV 1~4）。在我国，HPIV 是继流感病毒A 型和呼吸道合胞病毒后又一引起儿童急性呼吸道感染的常见病毒^[1]，各地的HPIV 的检出率存在一定的差异，目前尚无上海地区HPIV 流行病学及与气候关系的研究。为此，本研究通过监测2011~2013 年上海南翔医院儿童急性呼吸道HPIV 感染以及该地区的气候变化，了解该地区 HPIV 的流行特征及与气候因素的关系。

2011 年1 月至2013 年12 月上海市嘉定区南翔医院儿科门诊呼吸道感染患儿2 526 例为研究对象，其中男1 468 例，女1 058 例，男女之比1.4 : 1。 患儿年龄0~12 岁，其中婴儿组（ < 1 岁）104 例， 幼儿组（1 岁~）587 例，学龄前儿童组（3 岁~） 1 212 例，学龄儿童组（6~12 岁）623 例。

急性呼吸道感染的诊断标准参照《诸福棠实用儿科学》第7 版^[2]：（1）发热（≥ 38.0℃）、 寒战；（2）咳嗽，咳痰，鼻塞，流涕，胸痛，咽痛， 听诊肺部呼吸音异常；（3）胸部X 片提示肺部炎症改变。

采集咽拭子一根放入含有3 mL 病毒运输液的试管中4℃保存，24 h 内低温运送检测。

RT-PCR 检测根据试剂盒（QIAamp Viral RNA Mini Kit）说明书，提取总病毒核酸，逆转录合成 cDNA。选用QIAamp 210212 试剂对送检的鼻咽部分泌物标本一步法多重PCR 法检测病毒（Multiplex RT-PCR）。Multiplex RT-PCR 以RNA 为模板，分 5 管，分别检测HPIV（1~4 型）。反应条件为： 94℃ 2 min，94℃ 30 s，55℃ 30 s，72℃ 60 s，72℃ 7 min，共60 个循环。所有PCR 产物经2% 凝胶电泳分析，阳性产物进行测序验证。病毒检测在中国科学院上海市巴斯德研究所病原诊断中心完成。

气象资料由上海市嘉定区气象局提供，气象观测站地理位置为东经121°15' 北纬31°22'。该地区2011~2013 年月平均气温、月降雨量及月相对湿度见表 1。

表 1(Table 1)

表 1 嘉定地区2011~2013 年月平均气温、月降雨量及月相对湿度

表 1 嘉定地区2011~2013 年月平均气温、月降雨量及月相对湿度

统计学数据分析采用SPSS.19 软件包。计数资料用率（%）表示，组间比较采用卡方检验或 Fisher 精确概率法，多组间两两比较采用卡方分割法。呈正态分布的计量资料用均数± 标准差（x± s ） 表示，非正态分布的计量资料用中位数（范围） 表示。相关分析采用Pearson 相关分析或Spearman 相关分析。各气象因素间的交互作用、自变量的筛选采用逐步回归分析。P < 0.05 为差异有统计学意义。

2011 年1 月至2013 年12 月共送检标本2 526 例，HPIV 总检出率为5.62%（142/2 526），其中 HPIV-1 46.5%（66/142），HPIV-3 31.0%（44/142）， HPIV-2 17.6%（25/142），HPIV-4 4.9%（7/142）。 男性HPIV 阳性率5.52%（81/1 468），女性5.77% （61/1 058），不同性别患儿HPIV 检出率比较差异无统计学意义（χ²=0.071，P>0.05）。

婴儿组HPIV 阳性率为4.8%（5/104），幼儿组为7.2%（42/587），学龄前组为5.6%（68/1 212）， 学龄儿童组为4.3%（27/623），不同年龄组间HPIV 检出率差异无统计学意义（χ²=4.521， P=0.207）。HPIV-1 和HPIV-3 型检出率在幼儿组均为最高，分别为3.4%（20/587）和2.4%（14/587）。 HPIV-2 和HPIV-4 型在婴儿组中均未检出。

2011~2013 年间，不同年度间HPIV 的总检出率不同（χ²=26.179，P <0.01），以2012 年最高。 HPIV-1 和HPIV-2 检出率在不同年度间检出率差异有统计学意义（P <0.05），见表 2。

表 2(Table 2)

表 2 2011~2013 年间HPIV 1~4 型检出情况 [n（%）]

表 2 2011~2013 年间HPIV 1~4 型检出情况 [n（%）]

HPIV-1 和HPIV-2 在不同季节间检出率差异均有统计学意义，其中HPIV-1 检出率夏季（6~8 月） 高于秋季和冬季（P <0.0071）；HPIV-2 检出率夏季高于秋季（P <0.0071）；HPIV-3 和HPIV-4 检出率在四季的差异无统计学意义（表 3）。

表 3(Table 3)

表 3 不同季节HPIV 检出情况 [n（%）]

表 3 不同季节HPIV 检出情况 [n（%）]

春季（3~5 月）、夏季（6~8 月）、秋季（9~11 月）各型HPIV 检出率分布差异有统计学意义，其中春季和秋季以HPIV-1 和HPIV-3 检出为主，夏季HPIV-1 检出率高于HPIV-4（P <0.0071），见表 3。

逐步回归法分析研究显示，HPIV 月检出率与月气温和月降雨量存在相关性。相关分析显示 HPIV 总检出率与月平均气温呈正相关（r=0.598， P <0.01；图 1），与相对湿度无相关性（r_s=0.24， P=0.159），与月降雨量亦呈正相关（r_s=0.602， P <0.01；图 2）。

图 1 HPIV 总检出率与月平均气温的相关性

图 2 HPIV 总检出率与月降雨量的相关性

各地报道HPIV 检出率为3.7%~9.9%，病毒属中以1 型和3 型感染最多，其中以3 型检出为主^{[1, 3, 4, 5]}。本研究中，HPIV 总检出率为5.6%，其中以HPIV-1 检出率最高，其次为HPIV-3，HPIV-2 型和-4 型检出率较低。北京王芳等^[6] 研究发现， 在上呼吸道感染中以HPIV-1 为主，而在下呼吸道感染中以HPIV-3 为主。但广东学者发现，在下呼吸道感染患儿的鼻咽分泌物中HPIV-1 检出率高于 HPIV-3^[7]。HPIV 分型检出率是否与临床疾病相关有待进一步的研究。

在我国，HPIV 的流行不仅存在着一定的地域差异，也存在着明显的季节性。南京、温州等地区报道，HPIV-1 和HPIV-3 均好发春夏季^{[3, 4]}。广州地区报道显示HPIV-3 在秋冬季流行，HPIV-1 在夏秋流行^[5]。本研究结果显示HPIV-1 和HPIV-3 均在春夏季流行，其中夏季检出率最高，与南京地区报道结果^[3] 相同，可能是由于上海与南京地理位置相近，两地区气候条件基本一致。

我国各地研究显示，HPIV-3 的检出率与气候因素相关，其中以气温与HPIV-3 检出率最为密切， 其检出率与月平均气温呈中度正相关^{[8, 9]}。本研究发现在2011~2013 年间，HPIV-1 和HPIV-2 检出率在夏季（6~8 月）最高，期间的气温也是每年最高； 同时本研究相关分析亦显示，HPIV 总检出率与月气温呈显著正相关。以上结果提示气温越高HPIV 的活性越强。推测高温天气时HPIV 可形成大的气溶胶，其存活时间延长，增加了病毒易感性。本研究相关分析还显示，HPIV 阳性率与月降雨量呈显著正相关，与以往报道中HPIV-3 阳性率与月降雨量无相关性或相关性较弱存在差异^{[8, 9]}。可能与本研究以HPIV-1 检出为主有关。目前国内尚无有关HPIV-1 检出率与月降水量相关性的文献报道。

综上，本研究通过连续3 年监测，发现HPIV 是引起南翔地区儿童急性呼吸道感染的重要病原体，其中以HPIV-1 感染为主，好发于夏季，与月平均气温和降雨量呈正相关。掌握本地区HPIV 的流行特征及HPIV 活性与气候因素的相关性，为今后HPIV 感染的预防、治疗提供理论指导和科学依据。