呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus, RSV）是世界各地婴幼儿急性呼吸道感染的最重要 的病毒病原，其流行面广，发病率高，是导致儿 童病毒性肺炎、急性支气管炎的主要病原之一 ^{[1, 2, 3]}， 部分患儿发展为重症肺炎，甚至导致死亡 ^[4]。因此 观察RSV 流行规律及其相关因素，对于防治RSV 导致婴幼儿产生严重的并发症具有重要作用，但 目前国内外尚缺乏连续10 年以上的大样本并结合 气候因素的相关性研究，为此，本研究连续观察 11 年RSV 在我院住院患儿的发病情况，并结合当 地的气候因素，进行相关的分析，旨在全面系统 了解苏州地区住院患儿RSV 流行规律，为该地区 儿童RSV 早期预警、早期预防和及时治疗提供科 学依据。 1　资料与方法 1.1　研究对象

选取2001 年1 月至2011 年12 月期间在苏州 大学附属儿童医院住院治疗的急性呼吸道感染患 儿作为研究对象，急性呼吸道感染的诊断标准参 照《诸福棠实用儿科学》第7 版^[5]。收集鼻咽分泌 物标本共42 664 份，有确切性别记录者共42 574 例， 其中男28 377 例（66.65%）、女14 197 例（33.35%）， 男女之比1.99 : 1，年龄从出生后3 d 至15 周岁。 1.2　标本采集

标本通过一次性无菌吸痰管经鼻腔插入 7~8 cm 达咽部后负压吸取而得，新鲜制成脱落细 胞涂片用于RSV 等病毒抗原检测^[6]。RSV 阳性共 8 275 例，有确切年龄记载的8 186 例，其中~1 岁 组6 821 例（83.33%）；~3 岁组1 098 例（13.43%）； ~5 岁组207 例（2.53%）；>5 岁组60 例（0.73%）。 RSV 阳性有确切性别记载者8 257 例，其中男性 5 788 例，女性2 469 例，男女比例2.34 : 1。 1.3　病毒抗原检测

采用直接免疫荧光法，试剂为D3 Ultra TM DFA Respiratory Virus Screening & ID Kit （DIAGNOSTIC HYBRIDS USA）。脱落细胞涂片 自然干燥后用冷丙酮固定，分别加入RSV 和其他 6 种病毒（流感病毒A、B、副流感病毒1、2、3 和腺病毒）的单克隆荧光抗体10 μL 于相应涂片部 位，37℃避光孵育染色30 min，PBS（pH 7.4）冲洗后，结果于荧光显微镜（488 nm 激发光）下读取， 以每片不少于5 个RSV 阳性包涵体为阳性。 1.4　气象资料收集

由苏州气象局提供苏州市同期的气象资料， 包括月平均气温（℃）、月相对湿度（%）、月雨 量（mm）、月日照总和（h）和月平均风速（m/s）。 1.5　统计学分析

采用SPSS 20.0 统计软件包进行统计学分析。 计数资料以率（%）表示，组间比较采用卡方检 验；计量资料以中位数（四分位间距）[P₅₀（P₂₅， P₇₅）] 表示，非正态分布数据采用Kruskal-Wallis 法分析组间数据分布差异；双变量相关分析法分 析RSV 检出率与各气象因素的相关性，逐步线 性回归分析各气象因素对RSV 检出率的影响。 P<0.05 为差异有统计学意义。 2　结果 2.1　RSV 年度间流行情况

2001~2011 年RSV 总检出率为19.40% （8 275/42 664），年度检出率分别为24.94% （715/2 867）、25.83%（677/2 621）、24.05% （448/1863）、25.39%（468/1 843）、27.30% （276/1 011）、15.55%（558/3 588）、20.91% （820/3 922）、13.10%（641/4 892）、11.85% （608/5 132）、15.06%（974/6 469） 和24.72% （2 090/8 456），年度间差异有统计学意义 （χ²=828.96，P<0.01）。其他呼吸道病毒同期平均 年检出率为：流感病毒A 和B 型为4.92%，副流 感病毒1~3 型为4.19%，腺病毒为1.35%。 2.2　RSV 年度内流行情况

RSV 的流行主要集中在当年11 月至次 年4 月（15.42%~57.18%），高峰在12 月至次 年2 月（30.33%~57.18%），6~9 月是检出低 谷期（0~5.38%）。2011 年7 月RSV 检出率为 5.74%，为同期历史最高，8~9 月继续高发，分别 为21.09% 和31.15%，而往年同期最高值2.86% 和5.88%，差异有统计学意义（χ² 分别为19.95 和 9.82，均P<0.01）。以当年11 月1 日至次年4 月 30 日为1 个RSV 流行季节作统计，2001~2010 年 中9 个流行季节的总体检出率依次为40.75%、 22.72%、39.93%、27.37%、42.71%、21.28%、38.57%、19.86% 和29.73%，相邻两季间RSV 检出率差异有统计学意义（χ² 依次为106.60、 94.25、27.55、40.84、145.09、111.93、177.25 和 59.53，P<0.01）；2010~2011 年流行季节RSV 的 检出率为30.79%，与2009~2010 年比较差异无统 计学意义（χ²=0.78，P=0.38）。2001~2010 年间 RSV 流行季节呈现周期性隔年高峰，但2010 年后 未出现此规律（图 1）。

图 1 2001~2011 年RSV 流行情况月分布

以当年11 月1 日至次年4 月30 日为1 个 RSV 流行季节，当年5 月1 日至10 月31 日为1 个非RSV 流行季节。总体RSV 月检出率与月平 均气温、月日照总和、月雨量、月相对湿度和月 平均风速均呈负相关（rs 分别为-0.84、-0.47、 -0.31、-0.20 和-0.20，均P<0.05）； 逐步 回归分析显示只有月平均气温进入线性模型 （R²=0.64，P<0.01），回归系数为-1.52（t=15.21， P<0.01）。RSV 流行季节（ 当年11 月至次年4 月）月检出率与各种气象因素的相关性显示，RSV 月检出率与月平均气温和月日照总和均呈负相关 （r_s 分别为-0.54、-0.32，均P<0.05）；逐步回归 分析也只有月平均气温进入线性模型（R=0.27， P<0.01），回归系数为-1.62（t=4.66，P<0.01）。 除2010~2011 年流行季节与2009~2010 年流行季 节RSV 的总体检出率比较差异无统计学意义外， 2001~2010 年中9 个流行季节的总体检出率存在隔 年高峰趋势，且差异有统计学意义。2001~2011 年 中10 个流行季节气候因素之间的差异性，结果显 示只有月相对湿度和月平均风速流行季节间差异 有统计学意义，但两者流行季节间的月变化趋势 与RSV 月检出率无显著性相关，且对RSV 检出率 最为重要的月平均气温在流行季节间差异也无统 计学意义。2011 年7、8、9 月RSV 呈现异常高发 现象。见表 1~3 和图 2。

表 1(Table 1)

表 1 2001~2011 年RSV 月检出率与气候因素分布　[P50（P25~P75）]

表 1 2001~2011 年RSV 月检出率与气候因素分布　[P50（P25~P75）]

表 2(Table 2)

表 2 RSV 检出率与气候因素相关性分析

表 2 RSV 检出率与气候因素相关性分析

表 3(Table 3)

表 3 2001~2011 年间RSV 流行季节各项气候因素分布情况　[P50（P25~P75）]

表 3 2001~2011 年间RSV 流行季节各项气候因素分布情况　[P50（P25~P75）]

图 2 RSV 月检出率2011 年检出率 与2001~2010 年 平均检出率的对照。

RSV 是婴幼儿呼吸道最常见的病原体，其在 世界许多国家具有季节性流行特征，主要感染1 岁以内患儿[1,7-8]。RSV 感染后导致的病死率是流感 患者的9 倍多^[9]。Berkley 等^[10] 的一项前瞻性研究 显示，RSV 是婴幼儿重症肺炎最重要的感染源， 其发病年龄分布与总体呼吸道感染住院患儿年龄 分布接近。Haque 等^[11] 报道RSV 感染可致急性支 气管炎暴发，Chen 等^[12] 回顾性观察998 例急性支 气管炎感染患者，发现28.7% 为RSV 感染，居病 毒感染之首，其研究结果表明RSV 在苏州地区为 主要病原之一。Yusuf 等^[13] 报道气象条件对RSV 的流行有一定的影响，因此有必要探讨RSV 的流 行特点，并与气象条件相结合进行相关的研究。

本研究连续11 年行RSV 流行病学监测，证 实RSV 是苏州地区急性呼吸道感染患儿住院的一 个重要原因。RSV 仍是该地区冬春季婴幼儿急性 呼吸道感染最主要病毒病原 ^{[12, 14]}，RSV 流行主要 集中在当年11 月至次年4 月，高峰在12 月至次 年2 月，本研究结果与文献报道相类似^{[12, 15]}。本 研究结果同时显示，2001~2009 年苏州地区RSV 流行呈隔年高峰趋势，即年初的流行态势影响着 年末的流行，考虑其流行规律与人群免疫水平有 关，与邓洁等^[7] 的报道相一致，但这一规律从 2009 年后未出现，即2009~2010 年冬春（检出率 29.73%）和2010~2011 年冬春（检出率30.79%） 出现了连续2 个相同水平的高峰。另外，2011 年 7~9 月的异常高检出率创下了历史新高，上述表明 苏州地区RSV 的流行规律在发生变化。究其原因， 可能受苏州地区2009 年8 月至2010 年3 月间甲 型H1N1 流感的影响，从而加强了该地区呼吸道病 毒全面防范措施，该期间RSV 流行间接受到了监 控。van der Sande 等 ^[16] 研究显示，冈比亚连续6 年RSV 感染高发于8~11 月的雨季，随后3 年同样 的季节没有流行而是发生在12 月及次年的3 月、 8 月与10 月，随后2 年又恢复到了3 年前的流行 规律。其研究结果表明RSV 流行整体规律不变，但具有一定波动性，本研究结果与之类似。以上 研究结果表明连续长期的的监测易发现流行规律 的同时也会捕捉到规律的变化，对于RSV 的早期 预警有一定的帮助，但RSV 在苏州的长期流行趋 势仍需进一步深入观察。

不同地理位置具有不同气候情况，RSV 流行 情况也不同，热带、亚热带和寒带地区RSV 可常 年流行，且气温高于24~30℃和在2~6℃时RSV 检 出率达到高峰，而温带地区RSV 主要流行于冬春 季^{[13, 17]}。苏州地区与温带地区气候接近，本研究及 本课题组前期的监测均显示RSV 流行季节主要集 中在每年的11 月至次年4 月，6~9 月很少检出^[14]， 本研究连续11 年监测结果显示相对湿度、降雨量 与风速也与RSV 的流行有一定关系，但RSV 流 行季检出率与平均气温呈明显负相关，且逐步回 归分析显示只有月平均气温进入线性模型，表明 气温对RSV 流行具有显著影响，即阴冷气候季节 RSV 检出率高。Yusuf 等^[13] 的研究结果提示，RSV 流行与气温呈负相关，且RSV 流行与日光中紫外 线辐射呈负相关；du Prel 等^[17] 研究发现RSV 感 染与气温呈负相关，本研究结果与其类似。Madhi 等^[18] 也有类似报道。以上研究提示，低温可提高 RSV 在气溶胶中的稳定性，同时寒冷使儿童呼吸 道毛细血管痉挛、缺血，黏膜上皮纤毛运动减弱， 利于RSV 的繁殖。

本研究也具有一定的局限性，虽然进行长达 11 年的监测，但未对RSV 亚型致流行规律波动进 行相关的研究，因此后期需进一步在监测RSV 流 行的同时，需通过从G 蛋白序列测序方面着手更 深入探究RSV 流行及变异规律。

综上，本研究观察11 年间我院住院患儿RSV 流行情况，结合苏州市气候因素进行初步分析， 得出苏州市儿童RSV 呈隔年流行状况，RSV 流行 与气候因素有一定关系，尤其是温度对RSV 的流 行起重要作用，因此应该针对高危人群、高发季 节及相关的气候因素采取适当的防治措施，以有 效减少RSV 感染的发生。