过敏性紫癜（Henoch-Schönlein purpura,HSP）是一种以小血管为主要病变的变态反应性疾病，2012年6月欧洲风湿病年会将HSP更名为IgA血管炎，分类上隶属于小血管炎下的免疫复合物性血管炎。HSP为儿童常见病，近年来发病率逐年增加，但其确切的发病机制迄今尚未完全清楚^[1]。目前认为HSP的发病非单一因素所致，在环境因素、个体遗传等作用下，机体出现细胞和体液免疫功能紊乱，产生多种细胞因子、炎症介质、抗体等，抗体、补体和纤维蛋白原等沉积于肾小球系膜、皮肤和肠道小血管，导致小血管结构异常和损伤，进而可引起血液高凝状态及局部微血栓形成等。其中细胞因子是HSP发病中重要的因素之一^[2]。高迁移率族蛋白1（high mobilitygroup protein box1,HMGB1）是一种新型的炎性细胞因子，具有强大的致炎作用，介导免疫炎症反应的发生和发展。研究发现HMGB1参与了类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等多种自身免疫性疾病的发生和发展^[3]。目前国内甘世伟等^[4]报道了HSP患儿HMGB1表达较对照儿童增高，且伴有肾损害、消化道症状、关节症状等的患儿与无上述症状患儿相比表达有明显差异；Chen等^[5]研究提示HMGB1可能通过诱导肿瘤坏死因子α和白细胞介素（interleukin,IL）-6参与HSP的发病机制。超敏C反应蛋白（high-sensitivity C-reactive protein,hs-CRP）是使用高敏感的检测方法检测到的低浓度的CRP，在过敏性紫癜急性期CRP等反映炎症的指标可增高。D-二聚体（D-dimer,D-D ）是反映机体高凝状态和继发性纤溶的分子标志物之一。本研究通过检测HSP患儿血HMGB1、hs-CRP、D-D的表达水平，分析HMGB1 与hs-CRP、D-D的相关性，旨在进一步探讨HMGB1在儿童HSP发病过程中的作用。 1 资料与方法 1.1 研究对象

采用病例对照研究，选择HSP患儿以及健康对照儿童作为研究对象。HSP组入选标准：（1）符合儿童HSP诊断标准^[6]；（2）初次发病的患儿，病程在3 d内；（3）近4周内未使用任何糖皮质激素或细胞毒性药物，采血前24 h未使用任何药物；（4）除外伴有其他儿内科疾病者或HSP暂不能确诊者。以同期健康体检儿童为对照组，对照组入选标准：（1）年龄、性别与HSP 患儿相匹配；（2）既往无过敏性疾病病史；（3）近4周内未使用任何糖皮质激素或细胞毒性药物，采血前24 h未使用任何药物。本研究经我院医学伦理委员会批准，所有受试对象家长均知情同意。40例HSP患儿纳入本研究，其中男23例，女17例，平均年龄7.4±2.1岁（范围3~12岁）。对照组纳入30例，其中男17例，女13例，平均年龄7.2±2.0岁（范围4~11岁）。两组儿童的年龄、性别差异无统计学意义（分别t=0.461，P=0.646；χ2=0.005，P=0.944）。40例HSP 患儿中，12例合并肾损害，28例随访半年未发现肾损害。 1.2 标本采集

HSP患儿入院当日或次日清晨采集空腹外周静脉血2 mL，对照组于体检日采集空腹外周静脉血2 mL，离心取血清，-20℃冰箱保存待测HMGB1含量。同时分别用临床免疫管和血凝管采集外周血测定hs-CRP和D-D含量。 1.3 血清HMGB1的检测

采用酶联免疫吸附法检测血清HMGB1的水平，试剂盒购自上海百沃科技有限公司，按照仪器操作规程和试剂盒说明书要求进行，严格质量控制，减少误差。以标准品浓度作为横坐标，OD值作为纵坐标，绘制标准曲线，得出标准方程，根据标准方程计算出每个样本的浓度。 1.4 血hs-CRP和D-D含量的检测

应用全自动生化分析仪检测血清hs-CRP，采用全自动血凝分析仪检测血浆D-D，严格按照操作程序完成定标和检测，同时进行室内质量控制。血清hs-CRP正常参考值0~8.83 mg/L，血浆D-D为0~500 mg/L。 1.5 统计学分析

采用SPSS 17.0统计软件进行统计学分析。计量资料以均数±标准差（x±s）表示，两组间均数的比较采用成组t检验。计数资料以例数和百分率表示，组间比较采用卡方检验。采用Pearson进行参数间的相关性分析。P＜0.05 为差异有统计学意义。 2 结果 2.1 两组儿童血HMGB1、hs-CRP及D-D含量的比较

HSP组急性期血HMGB1、hs-CRP、D-D含量均较对照组增高，差异有统计学意义，见表 1。以血hs-CRP>8.83 mg/L和D-D>500 mg/L作为阳性判断结果，则HSP 组血hs-CRP和D-D阳性率明显高于对照组（均P＜0.05），见表 2。

表 1(Table 1)

表 1 HSP组和对照组血HMGB1、hs-CRP及D-D含量的比较（x±s）

表 1 HSP组和对照组血HMGB1、hs-CRP及D-D含量的比较（x±s）

表 2(Table 2)

表 2 HSP组和对照组血hs-CRP和D-D阳性率的比较

表 2 HSP组和对照组血hs-CRP和D-D阳性率的比较

伴肾损害组HSP患儿血HMGB1、hs-CRP、D-D含量较无肾损害组患儿增高，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表 3。

表 3(Table 3)

表 3 伴或不伴肾损害HSP儿童HMGB1、hs-CRP、D-D含量的比较（x±s）

表 3 伴或不伴肾损害HSP儿童HMGB1、hs-CRP、D-D含量的比较（x±s）

男性HSP患儿血HMGB1平均含量较女性患儿稍高，hs-CRP、D-D平均含量较女性患儿稍低，但差异均无统计学意义（均P>0.05），见表 4。

表 4(Table 4)

表 4 不同性别HSP患儿HMGB1、hs-CRP及D-D检测结果的比较（x±s）

表 4 不同性别HSP患儿HMGB1、hs-CRP及D-D检测结果的比较（x±s）

HSP患儿血HMGB1与hs-CRP、D-D均呈正相关（ 分别r=0.878、0.625，均P＜0.001）；hs-CRP与D-D呈正相关（r=0.622，P＜0.001）。 3 讨论

HMGB1作为一种核内非组蛋白被发现，在细胞内参与DNA的复制、转录、翻译和修复等过程，在细胞外，具有细胞因子的功能，具有强大的致炎作用。同时也可作为内源性损伤相关的分子模式激活抗原提呈细胞，参与T、B淋巴细胞的分化、成熟和活化，从而参与多种疾病发生和发展^{[7, 8]}。研究证实HMGB1能活化单核巨噬细胞、中性粒细胞等多种炎症细胞，促进一系列细胞因子和炎性因子如IL-1、IL-6、IL-8、基质金属蛋白酶等大量释放^{[8, 9]}；反之，许多炎症介质，如肿瘤坏死因子（TNF）α、脂多糖、IL-1等，能促使单核巨噬细胞、中性粒细胞等加速表达和分泌HMGB1，如此恶性循环，触发瀑布式的炎症反应^{[10, 11, 12]}。近年研究认为HMGB1可通过调节凝血酶-血栓调节蛋白复合物、结合组织型纤溶蛋白酶原和纤溶酶原等影响凝血和纤溶系统，具有促进血栓形成和激活纤溶防治血栓形成的双重作用^[13]。HMGB1在癌症、感染性疾病、免疫性疾病、动静脉血栓、动脉粥样硬化等发生和发展中都起了重要作用^{[13, 14]}。

hs-CRP敏感性和特异性均较CRP高，已成为临床检测的炎症标志物^[15]。本研究结果显示HSP组hs-CRP水平显著高于对照组，以阳性率来统计，对照组无一例阳性，hs-CRP阳性率达55%，与有关文献报道一致^[16]。新近研究表明CRP本身也是促炎症介质，可直接参与炎症过程，其水平高低与炎症反应的程度有关^{[17, 18]}。以上研究结果提示，HSP患儿体内高浓度的hs-CRP可损伤血管内皮细胞，直接参与患儿的小血管炎症反应。D-D升高或阳性反映了凝血和纤溶系统的双重激活，临床上广泛用于机体高凝状态的检测。Yilmaz等^[19]研究认为D-D可作为HSP高凝状态标志物。本研究结果表明HSP组D-D阳性率明显高于对照组，测定的浓度也明显高于对照组，提示HSP患儿存在高凝状态，与已有的文献报道一致^{[20, 21]}。可能原因为HSP病理变化是以毛细血管炎为主的广泛的小血管炎、血管内皮细胞损伤、肿胀，病变累及部位均可有微血栓形成和继发性纤溶。本研究发现有肾损害组血hs-CRP和D-D含量均明显高于非肾损害组，提示hs-CRP和D-D增高明显者更易出现肾损害。

本研究通过检测HMGB1在HSP儿童中的表达，研究其与hs-CRP、D-D的相关性来研究HSP在儿童HSP中的作用。本研究结果显示，HSP组HMGB1血清水平较对照组明显增高，同时研究发现肾损害组HMGB1血清水平较非肾损害组明显增高。既往发现在HSP发病中，有多种细胞因子的参与，TNF-α、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-26、IL-28、血管内皮生长因子、转化生长因子-β等均可能是HSP及HSP肾炎发病的重要原因^{[2, 22]}。本研究结果提示HMGB1 可能参与了儿童HSP及HSP肾损害的发病，HMGB1增高程度高者更易发生肾损害。相关分析表明HSP患儿血清HMGB1与hs-CRP、D-D均呈正相关；hs-CRP 与D-D呈正相关，因此推测HMGB1参与了HSP的血管炎症反应。HMGB1高者可间接反映HSP患儿存在血液的高凝状态，主要机制可能是HMGB1通过活化多种免疫炎症细胞，与多种细胞因子交互作用，破坏免疫平衡引起免疫紊乱、触发和加重炎症反应，引起全身小血管的损伤和炎症，而血管炎症和损害加之HMGB1本身对凝血功能的影响等可致微血栓形成，进而活化纤溶系统。近年研究认为HMGB1可作为治疗的靶点来干预多种免疫相关疾病^[23]，我们拟进一步研究HMGB1参与HSP发病的分子机制，研究不同病程及药物干预下的表达等，为HMGB1治疗免疫性疾病的临床应用提供理论基础。