目的：探索大鼠骨髓间质干细胞体外诱导分化为胰岛素分泌细胞的方法。为解决胰岛移植物来源匮乏这一问题提供新的思路。方法：采用横向分化技术,将成年大鼠骨髓间质干细胞诱导成为胰岛素分泌细胞。间接免疫荧光法鉴定诱导前后细胞nestin、胰岛素、胰高血糖素、生长抑素及Pdx-1的表达,RT-PCR法检测诱导前后细胞nestin,胰岛素-1,葡萄糖转运子-2,葡萄糖激酶及其转录因子Isl-1,Pdx-1,Pax-4和Pax-6 mRNA的表达;测定24 h胰岛素分泌量和胰岛素刺激实验评价诱导前后细胞的功能。结果：诱导5 h,nestin阳性细胞为(44.6±7.3)％;诱导24 h,nestin阳性细胞增至(61.8±8.4)％;此后,nestin阳性细胞数目开始下降,诱导第14天后,nestin表达基本消失。诱导后的胰岛素分泌细胞可以表达胰岛素、胰高血糖素、生长抑素和Pdx-1等蛋白;表达胰岛素-1、葡萄糖转运子-2、葡萄糖激酶及其多种转录因子mRNA;胰岛素分泌量增加;胰岛素刺激实验反应敏感等。而诱导前MSCc不县备上述特点。结论：大鼠骨髓间质干细胞体外可以诱导成为胰岛素分泌细胞,为胰岛移植开辟新的研究思路。
目的：观察新生大鼠内毒素休克时血清TNF-α和NO的动态变化以及与心肌细胞损害的关系,探讨地塞米松(DXM)对心肌的保护作用。方法：健康7 d Wistar大鼠17只,随机取9只作实验前基础值组,余108只随机分成对照组、休克组(LPS 5 mg/kg)及治疗组(LPS 5 mg/kg+DXM 5 mg/kg)。各组于注射LPS前(0 h)及注射后2,4,6,24 h分别断头取血并留取心脏组织。双抗夹心ELISA方法测定血清TNF-α浓度,硝酸盐还原酶法测定血清NO浓度,以透射电镜观察心肌超微结构改变。结果：①休克组TNF-α于注射LPS2 h达高峰,6 h后下 降到对照组水平。注射LPS 2 h后,DXM组TNF-α高于对照组(P<0.05),但明显低于休克组(P<0.05);注射LPS 4 h,DXM组TNF-α含量低于休克组(P<0.05),但与对照组差异无显著性(P>0.05)。LPS注射后6 h起,3组问TNF-α差异均无显著性(P>0.05)。②休克组血清NO从注射LPS 2 h起升高(P<0.01),24 h达高峰(P<0.01);从注射LPS 2 h起,DXM组血清NO均低于同时间点休克组(P<0.01)。③心肌超微结构改变:休克组于注射LPS 6 h心肌细胞少数线粒体有空泡变性,24 h出现心肌纤维断裂、大量线粒体空泡变性、坏死。而DXM组在注射LPS24 h仅少数线粒体有空泡变性,心肌纤维完整。结论：内毒素休克新生大鼠通过释放炎症介质损害心肌组织,DXM通过抑制炎症介质
目的：重度脑室内出血常导致脑积水及其它后遗症,本文评估连续腰穿对新生儿重度脑室内出血(IVH)的疗效。方法：对我院1993年以来30例行连续腰穿(LP)治疗的严重脑室内出血(IVH)患儿进行疗效评估。并与30例未予任何防治IVH后脑积水措施的严重IVH进行对照。结果：经连续LP治疗的30例中,25例患儿的脑室停止扩张并明显缩小,有效率83.3％。初次LP日龄为(15.0±13.5)d,疗程(16.9±12.9)d,平均LP次数(6.4±4.7)次,平均LP间隔时问(2.9±2.7)d,平均每次脑脊液放液量(6.7±1.6)ml。LP治疗后起效时间为(9.6±5.5)d。10例在连续LP同时联用乙酰唑胺治疗,患儿增大的脑室在1-2周左右恢复正常或趋于稳定。25例中18例平均随访(8.3±1.9)月,体格、智能发育均正常,B超显示14例脑室形态正常,4例脑室轻度增大。每次脑脊液放液量>5 ml者及腰穿间隔时间<2 d者有效率明显较高(P<0.05或0.01)。对照组中23例脑室中重度扩张(其中6例并发脑积水),3例失访。结论：连续LP为治疗新生儿严重IVH的安全有效方法,可有效防止脑积水的发生发展。
目的：苯二氮革类抗痫药长期应用,可使2/3病人产生抗惊厥作用耐受性。本研究探讨苯二氮(?)类抗惊厥药物的耐受性和用氟马西尼(Ro15-4513)逆转耐受性的受体分子机制。方法：一组大鼠腹腔注射氟西泮2周,产生有氟西泮耐受性而无依赖性的听源性惊厥大鼠模型。另一组大鼠于氟西泮用药第8天起,每天腹腔注射1次Ro15-4513,共7 d,观察对耐受性的影响;对照组腹腔注射同等体积的20％丙二醇。每组5只。用竞争性定量RT-PCR测定大鼠脑皮质运动区和海马区的GABAA受体α1、α3、α5、γ2L和γ2S亚单位mRNA的含量。结果：与对照组相比,氟西泮耐受组大鼠皮质运动区的α1亚单位下降24％,α3下降17％,α5上升33％,γ2L下降35％,γ2s下降45％,差异均有显著性(P<0.05或0.01);海马区的α1下降33％,γ2L下降35％,γ2s下降27％,与对照组比较差异均有显著性(P<0.05)。合用Ro15-4513组大鼠皮质运动区GABAA受体α1、α3、α5、γ2L和γ2s亚单位mRNA含量与对照组相比差异均无显著性(P>0.05);海马区α1、α5、γ2L和γ2s亚单位mRNA含量与对照组相比也同样差异无显著性(P>0.05)。结论：听源性惊厥大鼠的氟西泮耐受机制与中枢GABAA受体α1、α3、α5、γ2L和γ2s亚单位mRNA皮质运动区含量的适应性改变有关。Ro15-4513通过影响皮质运动区和海马
目的：先天性心脏疾病(CHD)患儿易发生感染,有作者认为CHD可能是DiGeorge综合征(DGS)的一部分,CHD患儿对感染的易感性与其存在不同程度的免疫缺陷有关。本文探讨CHD患儿有无免疫功能缺陷,结合文献讨论CHD与DGS的关系。方法：通过胸部X片回顾性观察因患肺炎而住院的72例单纯性和34例复杂性CHD新生儿胸腺影的大小,50例同日龄肺炎新生儿作为对照。检测28例学龄前期CHD患儿外周血淋巴细胞亚群、淋巴细胞增殖功能及外周血单个核细胞(PBMC)白细胞介素-4(IL-4)和干扰素-γ(IFN-γ)mRNA表达情况及培养上清中IL-4和IFN-γ水平,血浆IgG、IgA、IgM及C3水平。20例同年龄健康儿童作为对照。结果：所有新生儿胸片均可见到胸腺影,单纯性和复杂性CHD新生儿胸腺影大小与肺炎新生儿比较差异均无显著性(P>0.05);学龄前期CHD患儿外周血CD3+,CD4+,CD8+,CD19+及CD16+CD56+T细胞和CD4+/CD8+与对照组差异无显著性(P>0.05);血浆免疫球蛋白及C3水平与对照组比,差异也无显著性(P>0.05);PBMC加植物血凝素(PHA)和脂多糖(LPS)刺激后的每分钟脉冲数、PBMC培养上清中IL-4,IFN-γ水平和mRNA表达与对照组比较差异无显著性(P均>0.05)。结论：并非所有CHD患儿均伴有胸腺发育不全或免疫功能缺陷,CHD患儿易感染不一定是先天性免疫功能低下的表现。
目的：探讨NF-κB信号途径在新生鼠败血症中的作用,为临床寻求以NF-κB为靶点的治疗手段提供实验依据。方法：应用10 d新生大鼠制备金黄色葡萄球菌败血症模型。采用电泳迁移率改变分析(EMSA)方法检测败血症新生鼠肺脏NF-κB的表达情况和应用吡咯-硫氨基甲酸酯(PDTC)后肺脏NF-κB活性变化情况。结果：金黄色葡萄球菌败血症新生鼠的肺脏NF-κB活性于注菌后1 h开始增强,3 h达高峰。PDTC对肺脏NF-κB活化有抑制作用,且剂量越大,抑制作用越强。结论：新生鼠金黄色葡萄球菌败血症时肺脏NF-κB有明显激活,且存在一高峰期。抗氧化剂PUTC能对金黄色葡萄球菌败血症新生鼠肺脏NF-κB活化有所抑制,且存在量-效依赖关系。
目的：探讨细胞间粘附分子-1(ICAM-1)单克隆抗体对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的保护作用。方法：48只7 d龄SD大鼠随机分为缺血缺氧组(A组)、ICAM-1单抗治疗组(B组)、生理盐水组(C组)和正常对照组(D组)。其中A组观察到再给氧后2 h,24 h,48 h,72 h和168 h处死,B,C,D组观察到再给氧后48 h处死。应用免疫组织化学法和HE染色观察1CAM-1在不同时间脑组织的表达和脑组织中性粒细胞浸润情况。结果：A组再给氧2 h,脑微血管内皮细胞ICAM-1微弱表达,24 h后表达开始增加,48 h达到高峰,同时受损脑组织中性粒细胞浸润也随之增加。B组再给氧48 h后,ICAM-1表达强度及中性粒细胞浸润比同时间点缺氧缺血组明显降低。结论：HIBD时ICAM-1的表达与中性粒细胞浸润密切相关,ICAM-1单抗对新生大鼠HIBD具有一定保护作用。
目的：转化生长因子-β1(TGF-β1)在脑损伤的发生、发展等过程中发挥着重要作用,实验性脑损伤动物可有TGF-β1的高表达。本文探讨急性脑缺血小鼠脑组织中TGF-β1的表达情况及其意义。方法：20只小鼠随机分为正常对照组和脑缺血模型组。通过结扎小鼠左侧颈总动脉制备脑缺血模型。原位杂交方法检测脑组织中TGF-β1 mRNA的表达。结果：模型组小鼠脑组织中TGF-β1的表达程度较高,其中8例为Ⅲ级,2例为Ⅱ级;而在正常对照组小鼠脑组织中基本不表达TGF-β1,仅1例表达为Ⅰ级。结论：TGF-β1可能与动物缺血性脑损伤的发生有关。
目的：低分子肝素是肾脏疾病治疗中常用药物,能抑制肾小球系膜细胞的增生,其机制常不清楚,本研究探讨低分子肝素(LMWH)对大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)增生水平的影响及其机制。方法：GMCs细胞共设3组:①GMCs组;②LPS组:即GMCs+LPS;③LMWH组:即GMCs+LPS+LMWH,而LMWH终浓度分别为2.5 IU/ml,25 IU/ml和250 IU/ml。采用MTT法于培养24 h和48 h观察各组中GMCs增生水平,选择药物的最佳GMCs增生抑制浓度及时间;采用免疫细胞化学方法观察培养48 h后3组(LMWH终浓度为250 IU/ml)GMCs涂片中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及核转录因子-κB(NF-κB)的表达;采用ELISA方法观察培养的上清液中MCP-1浓度。结果：LMWH 250 IU/ml组对GMCs增生的抑制最为显著,其GMCs增生水平低于LPS组和LMWH 2.5 IU/ml,25 IU/ml组(P<0.05);各浓度LMWH对GMCs增生的抑制作用48 h强于24 h(P<0.05)。LMWH 250 IU/ml组48 h的MCP-1阳性率明显低于LPS组(P<0.01),而与GMCs组差异无显著性(P>0.05);LPS组48 h的MCP-1阳性率明显高于GMCs组(P<0.01)。LMWH 250 IU/ml组48 h的NF-κB表达阳性率与LPS组和GMCs组比较差异均无显著性(P>0.05);LPS组的NF-κB表达阳性率明显高于GMCs组(P<0.01)。LMWH 250 IU/ml组GMCs培养上清液中MCP-1浓度明显低于LPS组(P<0.01),与GMCS组差异无显著性(P>0.05)。结论：LMWH能抑制大鼠GMCs增生，明显下调GMCs中MCP-1的异常表达及分泌，而对NF-κB活性无明显抑制。
目的：氧自由基和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)过多是造成心肌损害的重要机制,为有效保护心肌,为心肌损害治疗开辟一个新途径,本文研究参麦注射液(SMI)、生长激素(GH)、硫酸锌(ZnSO4)、维生素C(VitC)对过氧化氢(H2O2)或AngⅡ损伤下降的心肌细胞存活力(CMV)的影响。方法：用新生大鼠心肌细胞加入H2O2(200 μmol/L,500μmol/L)或AngⅡ(10-6mol/L,10-7mol/L)使CMV下降作为对照组(共4组);在加入H2O2或AngⅡ的同时加入SMI(5 ml/L和10 ml/L),VitC(50 mg/L),ZnSO4(15μmol/L和60 μmol/L)或GH(250 μmol/L和500μmol/L)作为保护组。检测各组在加药24 h后的CMV增高率。结果：SMI,GH,ZnSO4和VitC均可显著提高因H2O2损伤而下降的CMV增高率。以SMI 10 ml/L的效果最好;其次为ZnSO4 60 μmol/L;再其次为SMI 5 ml/L,VitC 50 mg/L;最差为GH 500 μmol/L,GH 250 μmol/L和ZnSO4 15 μmol/L,其中SMI 5 ml/L和VitC 50 mg/L间差异无显著性,后3者间差异也无显著性。SMI和GH可显著提高AngⅡ所致的CMV下降,以SMI 10 ml/L效果最好;其余依次为SMI 5 ml/L,GH 500 μmol/L和GH 250μmol/L,但后2者间差异无显著性(P>0.05)。结论：SMI和GH对因H2O2或AngⅡ损伤下降的CMV有显著提高作用。
目的：研究新生儿休克时血浆内皮素(ET-1)和心钠素(ANF)水平的变化及其与临床病程的关系。方法：以放射免疫分析法分别测定29例休克新生儿治疗前后血浆ET-1和ANF水平,并与18例对照组新生儿对比。结果：休克时血浆ET-1和ANF水平均明显高于对照组(P<0.01);休克纠正后ANF水平迅速下降,但ET-1水平下降不明显;感染性与非感染性休克患儿之间其ET-1和ANF水平无明显差异;休克合并心力衰竭时ET-1和ANF水平下降均较缓慢;休克时ET-1和ANF水平呈显著正相关关系(r=0.76,P<0.05)。结论：血浆ET-1和ANF均可能参与了新生儿休克的发病机制和病理经过,并可作为判断休克转归的重要参考指标。
目的：探讨QT间期离散度(QTcd)对窒息新生儿心肌损害的诊断价值。方法：对窒息后伴有心肌损害的62例新生儿在生后48 h内和治疗10～14 d后同时测定QTcd和血清CK-MB值,按生后48 h内血清CK-MB升高的程度将心肌损害分为轻度、中度、重度3组,以22例健康新生儿作为对照组,观察各组QTcd的差异和与血清CK-MB值的相关性。结果：发病48 h内与对照组比较,心肌损害各组QTcd均显著高于对照组,且随着心肌损害程度的加重QTcd逐渐增大;QTcd与CK-MB呈正相关(r=0.702,P<0.01)。治疗后各组QTcd和CK-MB值均有显著下降(P<0.01)。结论：QTcd可作为判断新生儿窒息后心肌损害及其严重程度的一项客观指标。
目的：探讨新生儿肺炎克雷伯菌感染的临床特征及耐药特点并指导临床用药。方法：回顾分析26例经痰、血液及尿培养确诊为肺炎克雷伯菌院内感染的新生儿临床资料、细菌药敏试验结果、治疗情况及预后。结果：26例肺炎克雷伯菌感染的新生儿中73.1％为早产儿。肺炎克雷伯菌感染的部位常见为呼吸道,其次为败血症及泌尿道。早产、低体重、机械通气治疗为新生儿感染的易患因素。共培养出肺炎克雷伯菌30株,其中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)阳性菌株18株(60％),对亚胺培南、环丙沙星、氧氟沙星普遍敏感;对他唑仙、舒普深耐药率低(11.1％～22.2％);对头孢他啶、头孢噻肟、头孢曲松的耐药率达88.9％～100％,明显高于ESBLs阴性组。结论：早产、低出生体重儿易患肺炎克雷伯菌感染。亚胺培南及含β-内酰胺酶抑制剂复合物的药物为新生儿病房产ESBLs的肺炎克雷伯菌感染的首选药物。
目的：进一步阐明小儿病理类型表现为膜性肾病的乙型肝炎病毒相关性肾炎(乙肝肾)、狼疮性肾炎(狼疮肾)、原发性肾病综合征的临床和病理特点。方法：收集该院自1996年6月至2001年12月经肾活检确诊为膜性肾病41例,对3种膜性肾病之间进行临床和病理比较。结果：三种膜性肾病发病率乙肝肾占75.6％,狼疮肾14.6％,原发性肾病9.7％,它们临床表现大多为肾病综合征,病理分期Ⅰ～Ⅱ级为主。病理表现中系膜增生、电子致密物多部位沉积在乙肝肾、狼疮肾和原发性膜性肾病之间有明显差别(P<0.05)。结论：小儿膜性肾病以乙肝肾为主,原发性膜性肾病少见,三者有各自临床、病理特点,确诊须综合分析。
